蛋白A的优势在于其高流速和强结合能力，适合大规模抗体纯化。局限性包括非特异性结合和在特定条件下的稳定性问题。

通过重组表达去除N端白蛋白结合结构域后，蛋白G的血清蛋白结合水平降低，从而减少了非特异性结合，提高了纯化效率。

蛋白L适用于抗体片段的纯化以及那些不能被蛋白A和G有效结合的抗体亚型，如一些人源kappa轻链抗体。

主要区别在于PAM识别和切割末端。As Cas12a识别5'-TTTV PAM序列并产生交错末端，而Cas9识别5'-NGG PAM序列并产生平末端。交错末端在某些应用中更有利于DNA序列的精确方向整合。

As Cas12a(Cpf1)与crRNA形成的核糖核蛋白（RNP）转移到细胞中，更安全、快速，脱靶效应低，编辑效率高，逐渐成为CRISPR基因编辑的有效方式。

推荐将As Cas12a(Cpf1)核酸酶与Cas12a crRNA以等摩尔量结合。C末端带有SV40 NLS和nucleoplasmin NLS两个核定位信号，以及TEV蛋白酶切位点和6xHis标签，以确保最佳编辑效果。

人源基因敲除质粒是一种用于基因编辑技术的载体，通过构建并转染细胞，可以模拟特定基因的缺失或突变，从而研究该基因在疾病发生中的作用。

所有sgRNA文库细胞pool构建完成后都会通过NGS检测覆盖度，保证产品质量。

微生物CRISPR文库在生物医学研究、癌症治疗、农业改良、遗传性疾病治疗以及微生物基因功能研究等多个领域都有重要的应用。

分子育种：家畜和家禽的基因筛查有助于了解与其生长、繁殖、疾病、肉质等关键经济性状相关的分子机制。

CRISPR基因筛选系统为分子育种提供了大规模筛选的工具，推动了高效、多维度筛选工作的可行性。

抗病育种：利用猪全基因组CRISPR敲除文库筛选与病毒感染相关的宿主因子，如PDCoV、ASFV等，为制备抗病毒遗传修饰猪提供了新的靶标。通过研究猪对乙型脑炎病毒(JEV)等疾病的抗性，为猪的抗病育种工作带来了新的方向。

疾病研究：利用猪全基因组CRISPR敲除文库筛选与病毒感染相关的宿主因子，有助于了解病毒的感染机制，寻找有效的防控措施。筛选出的与病毒感染相关的宿主因子，如肠道黏膜屏障相关基因、细胞因子和炎症相关基因、病毒受体相关基因等，为疾病的治疗和预防提供了新的思路。

分子育种：鸡全基因组敲除文库为分子育种提供了大规模筛选的工具，推动了高效、多维度筛选工作的可行性。通过精准地敲除或编辑与生长、繁殖、疾病、肉质等关键经济性状相关的基因，有助于深入了解这些性状的分子机制，并可能通过遗传改良优化家禽的生产性能。

基因功能研究：鸡全基因组敲除文库为基因功能研究提供了丰富的工具，可以快速、准确地定位并研究基因的功能。通过敲除特定基因，可以观察其在生物体中的表达模式、调控机制以及与其他基因的相互作用关系，从而揭示基因在生命活动中的作用。

可用于药物开发、基因功能研究、疾病模型建立、基因编辑和基因治疗以及复杂生物系统解析等多个领域