纳米抗体(Nanobody),又称单域抗体,源自骆驼科动物(如羊驼)的重链抗体可变区 VHH 结构,分子量仅约15 kDa,约为传统抗体的1/10。其结构简单、稳定性强、亲和力高,被广泛应用于肿瘤免疫治疗、细胞疗法等研究领域。
泓迅生物构建了从抗原制备、动物免疫直至表达纯化的全流程服务体系。凭借在抗原设计、羊驼免疫、文库构建与高通量筛选等环节的技术积淀,我们确保从源头免疫到终产物交付的每一环节,为您提供高效、可靠的纳米抗体定制解决方案,致力于将您的靶点构想,高效转化为可靠的研发工具或候选药物。
| 阶段 | 服务内容 | 周期 (周) | 交付物 |
|---|---|---|---|
| 阶段1:抗原制备 | *蛋白抗原纯度和内毒素鉴定(>5mg/蛋白抗原) | 1-2 | 蛋白抗原鉴定报告 |
| 蛋白抗原偶联载体蛋白后进行免疫(可选) | 1 | 200ug 偶联载体蛋白的抗原 | |
| 阶段2:羊驼免疫(5次)和PBMC分离 |
*1只成年免疫羊驼,两种蛋白抗原免疫5次以上,每次0.5-1mg *PBMC分离 |
8-10 |
5ml免前血清和第3次免疫后血清; 3免后血清ELISA报告 |
| 阶段3:构建VHH噬菌体抗体库 |
*RNA提取和cDNA制备 *扩增VHH基因片段,构建纳米抗体免疫文库 *抗体库质量鉴定,挑选96个单克隆进行测序,分析序列多样性和正确率 |
4-6 |
中间产物(如RNA或cDNA); 提供文库质检报告,VHH容量达到108 - 109; 噬菌体展示纳米抗体免疫文库 (包含文库甘油菌1ml*10支和文库噬菌体质粒10ug) |
| 阶段4:噬菌体展示筛选和克隆鉴定 |
*抗原施压法进行3-5轮淘选 *挑取至少288个克隆进行ELISA验证 *鉴定和评估阳性克隆 *阳性克隆测序和测序结果分析 |
4-6 |
最后一次淘选产物; ELISA筛选报告; 每个蛋白抗原提供3-5个独特序列 |
| 阶段5:纳米抗体表达生产和测活验证 |
*3-5个纳米抗体基因克隆至真核表达载体 *重组抗体表达和QC测活验证 |
2-4 |
0.1-0.5mg纯化纳米抗体(SDS-PAGE>90%,内毒素水平<5EU/mg)和对应菌株; 纳米抗体ELISA检测报告 |
注:客户提供抗原的要求:纯度> 85%,浓度> 1 mg/mL,缓冲液为PBS。
