1、膜蛋白表达
泓迅生物利用自主无细胞表达系统,成功合成全长人源STEAP1膜蛋白。膜蛋白是生物体内细胞蛋白的重要组成部分,通常具有相对疏水的表面和柔韧性。无细胞表达技术克服了膜蛋白疏水性高、易错误折叠、易沉淀的诸多难点,无需繁琐的提取过程,即可获得高可溶性的膜蛋白。
无细胞蛋白表达技术通过在反应体系中直接添加去垢剂或纳米盘,可以为膜蛋白跨膜区提供疏水环境,实现膜蛋白正确折叠与可溶性表达。实验结果显示,去垢剂(Detergent) 与纳米盘(Nanodisc)两种形式的STEAP1膜蛋白均表现出优异的抗原活性。
• 无细胞+去垢剂平台(不表达不收费)
去垢剂形式的STEAP1膜蛋白示意图(左)与SDS-PAGE图(右)
去垢剂形式STEAP1膜蛋白:背景干净、结合稳定
• 无细胞+纳米盘平台
纳米盘形式的STEAP1膜蛋白示意图(左)与SDS-PAGE图(右)
纳米盘体系STEAP1膜蛋白:亲和力强
去垢剂形式的STEAP1膜蛋白与其抗体的亲和力约 0.619 nM;而纳米盘形式的STEAP1膜蛋白与其抗体的亲和力达到惊人的0.0782 nM,且膜支架蛋白与抗体无非特异结合!
去垢剂形式STEAP1膜蛋白与不同浓度梯度抗体亲和结果
纳米盘形式STEAP1膜蛋白与不同浓度梯度抗体亲和结果
膜支架蛋白与STEAP1抗体无非特异结合
2、难度蛋白表达
泓迅生物已成功实现对细胞难表达蛋白(例如膜蛋白)的高效快速合成,成为难表达蛋白的救星。达到96 %以上的成功率,在短短3天内快速的交付。
|
全长lgG
|
Fab
|
ScFv/VHH
|
核酸聚合酶
|
|
Trastuzumab
|
Ranibizumab
|
Brolucizumab
|
Phi29 DNA聚合酶
|
|
Toripalimab
|
Cetuximab
|
Caplacizumab
|
末端脱氧核昔酸转移酶(TdT)
|
|
代谢关键酶
|
膜蛋白
|
特殊靶点蛋白
|
难表达蛋白
|
|
Caspase-1
|
水通道蛋白
|
钙网蛋白
|
豹蛙酶
|
|
3-磷酸甘油脱氢酶
|
CXCR4
|
肉毒素Hc段
|
蛇毒丝氨酸蛋白酶
|
|
限制性内切酶
|
白介素
|
细胞因子
|
药用蛋白原料
|
|
EcORI
|
IL-2
|
IFN2
|
乌司他丁
|
|
HindlII
|
IL-4
|
GM-CSF
|
瑞替普酶
|
|
Smal
|
IL-7
|
VEGF
|
转肽酶
|
|
BamHl
|
IL-15
|
EGF
|
蓝藻抗病毒蛋白N
|
|
Xbal
|
IL-21
|
wnt3a
|
血红素加氧酶
|
3、非天然氨基酸插入
非天然氨基酸(non-natural amino acids, nnAAs)有结构多样的侧链基团,将其插入到蛋白质中可赋予蛋白质新的化学性质、结构及生物功能。
泓迅生物依托其无细胞蛋白质表达平台,提供位点特异性非天然氨基酸插入服务。该技术能够快速、高效地合成含有精准定位nnAA的蛋白质,并已在GFP及VHH蛋白的多位点嵌入实验中成功验证。服务支持pAcF与pAzF等非天然氨基酸,适用于精准抗体偶联药物开发,同时可基于客户提供的组分开展定制化nnAA测试。

插入效率测试