微生物基因组编辑_苏州泓迅生物科技股份有限公司

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微生物基因编辑

泓迅生物拥有独特的“GPS”平台，在基因型（Genotype）、表型（Phenotype）的基础上引入了人工合成型（Synotype），提供基因“读-写-编”一体化平台。泓迅生物依托专利的合成及组装平台，结合经验丰富的CRISPR-Cas9技术，已在大肠杆菌细胞和酵母细胞中建立了CRISPR基因编辑系统。

服务优势

可精确到碱基对且无选择标记残留
可高精度编辑任意基因
多重位点编辑
实验周期短

服务详情

服务项目	E. coli 基因敲除	E. coli 基因敲入	酵母基因敲除	酵母基因敲入
向导RNA设计	敲除菌株构建
客户提供的资料	• 需要编辑的菌株以及菌株的基本信息。 • 需要敲除基因和敲除序列的信息；或者敲入位点和替换序列的信息。
交付内容	编辑过的菌株
质量管理	• 测序数据 • COA
交付周期	4周起
价格	咨询

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服务流程

案例分享查看详细

案例一分析：CRISPR-Cas9技术敲除酵母菌ADE1基因

泓迅生物利用CRISPR-Cas9技术编辑酵母菌中的一个920bp的ADE1基因。ADE1是腺嘌呤合成相关基因，如果ADE1失活，则细胞将会积累红色色素，呈现红色菌落。

阳性克隆菌落

基因敲除

测序结果显示，转化子的ADE1基因缺失了18个碱基，被成功编辑。

案例二分析：CRISPR-Cas9技术将荧光蛋白基因敲入大肠杆菌

泓迅生物研究人员通过开发完善CRISPR-Cas9双质粒基因编辑系统及其生产工艺，成功将906bp的红色荧光蛋白（mScarlet）编码基因敲入到菌株E.coli的NC101基因组上 Clbp编码区域，敲入成功率高达96.6%~100%。

大肠杆菌基因编辑

图1 mScarlet基因敲入后克隆子的PCR鉴定电泳图

双质粒基因编辑

图2 mScarlet基因敲入后大肠杆菌基因组序列。（a）敲入位点上下游基因图谱及测序组装示意图，（b）敲入位点上下游测序序列峰形图。

大肠杆菌基因敲入

图3 荧光显微镜下大肠杆菌NC101突变株细胞图像。（a）白光下细胞图片，（b）594 nm光源激发后细胞图片。

常见问题

CRISPR/Cas9介导的微生物编辑难点在哪里？

培养条件与转化方法的多样性：不同微生物对生长环境的需求各异，这导致在实验室条件下培养它们时需要采用特定的条件。同样，将外源DNA导入这些微生物的转化方法也各不相同，增加了操作的复杂性。
质粒与元件在不同物种间的表达差异：质粒和其他基因编辑元件在不同微生物中的表达效率可能大相径庭。这要求研究人员必须针对目标微生物进行质粒的个性化设计和优化，以确保基因编辑的成功进行。
Cas蛋白敏感性与编辑效果的差异：不同微生物对Cas蛋白的敏感性不同，这直接影响到基因编辑的效率和准确性。因此，针对不同微生物，可能需要筛选和优化特定的Cas蛋白变体，以获得最佳的编辑效果。
微生物自身DNA修复机制的多样性：微生物具有不同的DNA修复机制，这些机制在基因编辑过程中可能起到干扰作用。了解并应对这些修复机制，对于提高基因编辑的成功率和减少脱靶效应至关重要。

针对不同物种的微生物进行基因编辑时，通常需要个性化改造系统质粒、优化转化工艺，并深入了解目标微生物的生物学特性，以确保基因编辑的有效性和精确性。

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案例一分析：CRISPR-Cas9技术敲除酵母菌ADE1基因

案例二分析：CRISPR-Cas9技术将荧光蛋白基因敲入大肠杆菌

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