A：首先主要看客户选择或者客户的下游应用，

如果客户期望蛋白有翻译后修饰、活性等，可以在三个真核系统中选择；（三个真核系统里我们会更倾向于哺乳系统）

如果客户对蛋白量需求比较高，可以选大肠杆菌，表达量高，成本比较低；

如果客户下游做抗原，可以选大肠杆菌；

如果客户给了序列信息，我们会查找有没有相关产品和文献参考；

最终系统还是要客户选择。

A：可以从以下几个方面进行尝试：

如果有稀有密码子，可以尝试重新进行密码子优化（即需要重新基因合成）

如果蛋白分子量过大或过小，可以尝试截短表达或融合大标签表达（即需要重新构质粒）。

如果是毒性蛋白，可以尝试pLysS菌株。

更换表达系统（即需要重新基因合成）。

A：可以从以下几个方面进行尝试：

a、优化宿主细胞（Origami B(DE3)，Rosetta gami(DE3)，Shuffle等）

b、与分子伴侣共表达，分子伴侣可以帮助蛋白形成正确的三维结构

C、融合促溶标签，(SUMO/GST/MBP/等)（这是我们最常用的促溶方法，促溶标签最常用sumo，而且原核系统免费提供酶切）

d、更换表达载体，pET系列载体表达量高，但包涵体概率也高，pCold低温表达载体理论上可提高蛋白可溶性

e、优化培养条件（温度、IPTG浓度、培养基成分）

f、分泌性表达，融合大肠杆菌分泌信号肽，将蛋白引导至周质空间（不建议，周质空间蛋白量少，浓度低）