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本系列试剂盒采用CRISPR/Cas9系统对微生物基因组进行编辑,编辑对象包括大肠杆菌、酿酒酵母、毕赤酵母等。可以实现对基因的敲除、敲入、点突变等。也可以同时对基因组的多个位点进行编辑。试剂盒中配备了实验过程所需要的载体及相关试剂,客户仅需合成数条引物即可完成整个实验。是适配基础科研、工业菌株改造、合成生物学研究的高效实验工具。
单点切割,基因删除:
单点切割,基因插入/突变:
单点切割,同时构建多个突变体:
不会,这正是本试剂盒的核心优势之一。
传统方法每轮编辑必须引入一个新的抗性标记,而本试剂盒采用无痕编辑:第一轮编辑完成后,质粒和抗性基因被完全清除,菌株恢复对抗生素的敏感性。第二轮编辑时,可以再次使用相同的筛选标记(如 G418 或 Zeocin ),因此理论上可无限轮次编辑。
试剂盒内含:
Cas9 表达质粒
gRNA 克隆骨架(线性化载体,可直接连接用户设计的双链寡核苷酸)
通用供体 DNA 模板质粒(用于插入或敲入)
阳性对照 gRNA 与供体 DNA(针对宿主菌的保守基因)
感受态细胞制备液及电转/化学转化缓冲液
质粒清除诱导剂(如需温度/化学诱导)
详细说明书及 gRNA 在线设计工具账号
用户需自行准备:
目标基因特异的引物(约2-4条)
常规分子生物学试剂(如T4连接酶、PCR mix、琼脂糖等,说明书会标注推荐品牌)
相应抗生素及培养平板
代谢组学分析