LNP传统包封率计算方法的“误导性”源于其自身的限制性，一方面忽略了生产过程中RNA的损失，包封率再高，整体RNA浓度不够也不能产生更大的收益；另一方面无法说明生产过程中工艺杂质（空LNP）的情况，导致LNP产品质量存在盲区。建议在早期处方筛选阶段，以体内外评价为主，包封率作为参考；在工艺开发阶段，以粒径分布和包封率为主，同时辅以空载率等指标，以实现更科学合理的项目推进。

A：大肠杆菌系统：成本低，效率高；是目前应用最广泛的体系，适合快速合成和筛选。

小麦胚芽系统：提供了真核翻译环境，适合表达真核蛋白质，特别是可溶性蛋白质和那些具有复杂折叠的蛋白质。

酵母系统(如酿酒酵母提取物)：一种翻译后修饰能力相对较强的真核系统，适用于糖基化蛋白的研究。

哺乳动物系统(例如,兔网织红细胞裂解液、CHO细胞提取物等)：适合合成具有复杂修饰的蛋白质，特别是处于近天然状态的哺乳动物蛋白质。

昆虫细胞系统：在翻译后修饰和蛋白质折叠方面占有优势，常用于膜蛋白和大蛋白。

是的，无细胞蛋白质合成系统非常适用于高通量应用。由于无需依赖活细胞培养，该系统可直接利用DNA模板快速合成蛋白质：

高通量特性：开放式系统可实现数小时至一天内的快速反应；易于并行操作且兼容自动化流程，特别适合大规模筛选和突变库测试。

表达产量：产量因系统类型而异。常见的大肠杆菌基无细胞系统可达毫克/毫升级别；小麦胚芽、酵母或哺乳动物系统产量通常较低，但能支持正确折叠和翻译后修饰。

小规模检测：完美适配低产量样本检测需求；可与荧光标记、放射性标记或免疫分析等技术联用实现灵敏检测，即使微量蛋白质也能进行功能或相互作用研究。

体内表达：依赖活体细胞，技术成熟且易于扩大规模，但受限于细胞生长周期。难以表达毒性蛋白或不溶性蛋白，且不易实施高通量和自动化流程。

无细胞表达：无需细胞培养，反应速度更快（一天内完成），高度适配高通量和自动化流程，并能表达毒性蛋白及其他难表达蛋白。不过目前成本较高，大规模工业应用仍有限。

A：最小量交付1OD，中间可以有任何简并碱基，包括NNK。

A：1. Trimer引物序列； 2. 各条引物中氨基酸的种类和比例； 3. 密码子表（可选）

A：（1）荧光修饰，可带荧光基团（如FAM，Cy3，FITC等）

（2）功能性修饰，例如NH2修饰、THS修饰、N3修饰、DBCO修饰等主要起连接作用， GalNac主要起肝靶向功能。

A: 我们是常温运输，常温下干粉状态可以存储几个月。客户收到样品后长期存储建议-20度保存。溶解后建议分装后冻存，用时取其中一管，避免反复冻融。

A: 常用如下修饰。最常用的修饰类型是前后各5个2’-MOE修饰，其他全硫代。长度一般 20nt。可以设计合成，设计只保证序列特异性。

A：可以。

A：对于用于蛋白表达的基因来说，多数情况下是有必要的。如真核生物的基因需要在原核生物中表达。由于真核生物的密码子偏好和原核生物有很大不同，对基因进行密码子优化将显著提高表达效率。

A：有的，常规Sanger测序我们限制样品类型为质粒、PCR已纯化产物、PCR未纯化产物。