A：sgRNA与Cas9/dCas9构建在同一个质粒载体上，称之为单载体系统；将这一个质粒载体转到细胞中即可发挥基因编辑功能；

sgRNA与Cas9/dCas9分别构建在两个质粒载体中，称之为双载体系统；这两个载体共同转入细胞中才能发挥功能。

目前构建过的敲除、激活、抑制文库既有单质粒系统，也有多质粒系统。

我司现有的敲除、激活载体单质粒系统，双质粒系统都有；抑制载体是单质粒系统。

A：不能,基因激活和抑制一般靶向启动子的不同区域，敲除文库靶向CDS区。

A：浓度最好达到200ng/ul。

A：1.芯片设计2.芯片合成3.文库构建和质粒制备4.NGS测序5.病毒包装（选做）。按照这个步骤收费的，需要先确认是否需要我们设计?如果需要，告知物种和基因ID，如果不需要提供序列评估报价，文库载体也确认下。

可以用NNk的一个混合物，也可以用Trimer引物构建基因文库。

他设计是针对不同区域进行的一个设计，但是设计的条数是一样的。SgRNA序列是不一样的。抑制文库是单质粒系统，激活文库大部分都是双质粒系统。

要先确定客户是多基因还是单基因，还要确定设计几条。如果说按照芯片设计价格是3000，也可以按照条数收费

Trimer引物合成的一个优势，，可以根据客户的物种进行一个设计。合成的方式效果也好，偏差更低。

一代测序，转到细菌上进行一个扩大，挑选单克隆去看测序的结果是否是在我们设计的序列之内。

至少是200-300条，客户全基因组范围比较大的话会设计更多。

三保一套餐是我们为确保基因敲除成功而提供的一种服务。我们承诺，通过提供三条sgRNA选择，确保至少有一条sgRNA能够成功敲除目标基因，从而为客户提供更大的成功率和保障。

我们采用的目的细胞是HepG2、Hela、293T细胞，如果有其他细胞要求，可以选择定制化服务。