CpG寡脱氧核苷酸（CpG ODNs）是一种具有免疫刺激作用的合成DNA序列，因其强大的免疫调节能力和广泛的适用范围而成为当前生物医学研究中的热点之一。

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泓迅CpG ODNs小课堂

1. 什么是CpG ODNs？

CpG ODN是人工合成的含有非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸（CpG）的寡脱氧核EUN的结构特征与免疫效应各有不同，一般分为A、B、C三类。

2. CpG ODNs有哪些类型？

根据化学结构和生物学活性，CpG ODNs 可分为 A、B 和 C 三种类型，不同类型的 CpG ODNs 的结构特点、功能和主要应用方向也各有不同。

A 类 CpG ODNs：A类以含有 PO 中心 CpG 的回文基序和 PS 修饰的 3’端 poly-G。功能上，它对B细胞活性较弱，但能够活化 pDC 诱生大量IFN-α。

B 类CpG ODNs：B类是一种全硫代修饰的线性 CpG ODNs，是发现最早的原型 CpG ODNs。功能上，它对B细胞具有较强的免疫刺激活性，但活化 pDC 产生 IFN-α 分泌的效果微弱。

C 类 CpG ODNs：C 类结合 A 类与 B 类的结构特征，含有一个完整的 PS 主干和一个包含 CpG 的回文基序。功能上，它既能够激活B细胞，又能活化 pDC 产生 IFN-α，但是其效果分别弱于单独使用 A 类或 B 类 ODN。

3. CpG ODNs可应用于哪些领域?

生物医学与癌症治疗：结合放疗过程中，CpG ODNs能显著增强抗肿瘤效果，并且促进树突状细胞的成熟和抗原加载。还有研究表明，利用聚酰胺胺树枝状大分子包裹磁性纳米粒子作为CpG ODNs的载体，可以有效诱导乳腺癌细胞凋亡。

过敏性疾病及哮喘：CpG ODNs可以通过调节免疫反应从Th2向Th1偏移来抑制过敏反应，对于治疗哮喘等过敏性疾病显示出良好的前景。例如，在NC/Nga小鼠模型中，经皮肤施用CpG ODNs能够显著降低血清IgE水平，减少炎症细胞浸润，并观察到了调节性T细胞的生成，这表明CpG ODNs可能成为一种有效的针对特应性皮炎的治疗方法。

感染性疾病：CpG ODNs作为佐剂用于疫苗开发或直接对抗某些病原体感染方面也有研究价值。比如，它们能够增强非典型流感嗜血杆菌特异性粘膜IgA反应，在预防中耳炎方面具有潜在作用。

疫苗研发：将CpG ODNs与其他成分组合使用，可以极大地提高抗原特异性免疫应答，同时避免了单独使用CpG ODNs可能导致的一些副作用。这种方法为开发新型合成疫苗提供了新的思路。

4. 购买CpG ODNs需要注意哪些参数？

CpG ODNs的类型，种属特异性、纯度、内毒素水平

5. CpG ODNs用什么溶解？

1. 无菌水
当实验或治疗对溶液的pH值和渗透压要求不严格时，无菌水可以作为一种简单的溶剂选择。
在某些特定情况下，如NaCl含量超过10%的样品，有研究表明可以使用无菌水稀释，但这种情况并未被国家标准广泛认可。
注意事项：
无菌水不存在对菌的保护作用，渗透压可能导致菌吸水胀裂死亡，因此不适用于需要保护生物活性的场合。

2. 生理盐水（NaCl溶液）
生理盐水具有与人体细胞液相似的渗透压，因此常用于需要维持细胞正常生理功能的实验或治疗中。在某些情况下，如需要补充体液或维持生理环境时，生理盐水是理想的选择。

注意事项：
生理盐水虽然具有适宜的渗透压，但缺乏调整pH值的能力。生理盐水中的NaCl可能引起同离子效应，影响某些药物的溶解。

3. PBS（磷酸盐缓冲液）
PBS具有盐平衡和可调整的适宜pH缓冲作用，是生物化学研究中广泛使用的缓冲液。
对于需要保持生物活性、稳定pH值和渗透压的物质，PBS是首选溶剂。PBS常用于稀释有活性的生物制剂，如病毒、疫苗等。

注意事项：
虽然PBS具有广泛的适用性，但某些生物活性物质可能需要更复杂的缓冲液来维持其最佳条件。大部分CpG ODNs可以在PBS溶液中溶解，有个别类型CpG ODNs不溶解。
在选择溶剂时，应根据实验或治疗的具体需求以及物质的性质进行综合考虑，确保所选溶剂能够满足实验或治疗的要求。

6. 溶解CpG ODNs时还需要注意什么

浓度：应根据实验或治疗的需要确定CpG ODNs的溶解浓度。浓度过高可能导致细胞毒性，而浓度过低则可能无法达到预期的生物效应。
溶解条件：在溶解CpG ODNs时，应避免剧烈搅拌或高温条件，以免破坏其结构或生物活性。
储存条件：溶解后的CpG ODNs溶液应储存在适当的条件下（如低温、避光等），以保持其稳定性和生物活性。

7. 贵司1mg的CpG可以分装成100ug每管吗？

我们发货形式默认1mg/管发货，不分装。客户收到后可以溶解分装冷冻，一次取用一管。

References:

1.Kayraklioglu Neslihan, Horuluoglu Begum, Klinman Dennis M.. CpG Oligonucleotides as Vaccine Adjuvants[J]. Methods in molecular biology,2020,51-85. doi:10.1007/978-1-0716-0872-2_4

2. Scheiermann Julia, Klinman Dennis M.. Clinical evaluation of CpG oligonucleotides as adjuvants for vaccines targeting infectious diseases and cancer. Vaccine,2014,32(48):6377-6389. doi:10.1016/j.vaccine.2014.06.065

3. Givens Brittany E, Geary Sean M, Salem Aliasger K. Nanoparticle-based CpG-oligonucleotide therapy for treating allergic asthma. Immunotherapy,2018,10(7):595-604. doi:10.2217/imt-2017-0142